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使用NanoPhotometer®豐富的應(yīng)用程序進行ADC藥物分析

發(fā)布日期:2023-09-28      瀏覽次數(shù):1141

抗體-藥物偶聯(lián)物即ADC是一類生物制藥藥物,是通過化學(xué)鏈將具有生物活性的小分子藥物連接到抗體上,抗體作為載體將小分子藥物靶向運輸?shù)侥繕思毎斜辉O(shè)計用于治療癌癥的靶向療法。與化學(xué)療法不同,ADC 旨在靶向并殺死腫瘤細胞,同時保留健康細胞。類似的還有新興的AOC(抗體-寡核苷酸偶聯(lián)物)基因治療技術(shù)。




NanoPhotometer®超微量分光光度計作為標準的紫外-可見法分析設(shè)備,已廣泛的應(yīng)用于包括ADC在內(nèi)的單抗、雙抗的定量。同時,設(shè)備的多波長/全波長測量功能,能夠同時測量抗體及偶聯(lián)物的吸光值和濃度。這使測量藥物抗體比(DAR)變得十分方便。DAR能明顯影響ADC藥物的毒性。如DAR過低,則抗體攜帶的效率較低;反之,如DAR 過高,機體易將其識別為異物從而快速清除。DAR的異質(zhì)性也可能導(dǎo)致毒性的不確定,造成毒性脫靶。




應(yīng)用程序1  UV法蛋白定量

標準的UV法蛋白定量模塊,提供基于消光系數(shù)法的蛋白濃度測量,測量主波長默認為280nm,同時也可根據(jù)抗體樣品實際的最大吸收波長進行設(shè)置。對于空載抗體的定量,通常使用默認的UV280法,并使用默認的320nm背景校正。當測量ADC樣品時,由于偶聯(lián)藥物的吸收峰通常出現(xiàn)在300-400nm之間,并于抗體之間有連續(xù)的紫外吸收,因此建議關(guān)閉背景校正功能(對于澄清樣品),以獲得準確的吸光值/濃度。在此模式下,如想在獲得抗體濃度的同時,也測量偶聯(lián)物的吸光值,可點擊光譜曲線,可選擇查看任意波長下的吸光值,找到對應(yīng)的偶聯(lián)物的最大吸收波長和吸光值即可。




應(yīng)用程序2  多波長測量

在分析化學(xué)應(yīng)用界面中,選擇單/多波長測量模塊,根據(jù)抗體和偶聯(lián)物的最大吸收波長,進行測量波長設(shè)置,并進行背景校正波長設(shè)置(可根據(jù)需要設(shè)置在可見光/近紅外波長區(qū)域)。測量結(jié)果可直接顯示抗體和偶聯(lián)物的吸光值,并輸出為報告。





應(yīng)用程序3  比值測量

核酸樣品的A260/A280、A260/A230比值是大家熟知的,而對于其他樣品而言,吸光值比值測量模塊可支持自定義的雙波長下吸光值比值的計算。如抗體測量A280值,偶聯(lián)物測量A378,則可得到兩個波長的吸光值和比值結(jié)果,并輸出為報告。






ADC樣品測量的良好實踐:

1. 可使用N60/NP80的混勻器進行5-10秒的樣品充分混勻

2. 基于測量目的,選擇對應(yīng)的應(yīng)用程序

3. 正確設(shè)置背景校正波長,這非常重要

4. 正確的清潔,高濃度或高粘度樣品建議進行空白回測


NanoPhotometer®還可配置符合GxP及《藥品數(shù)據(jù)管理規(guī)范》要求的合規(guī)性軟件,具有多層級用戶管理、電子記錄和電子簽名、審計追蹤和接入控制等功能,滿足客戶的合規(guī)性流程需要,在包括ADC在內(nèi)的生物制藥工藝開發(fā)、中試、生產(chǎn)、質(zhì)控中具有廣泛的使用場景和用戶基礎(chǔ)。



* 本文轉(zhuǎn)載自「Implen超微量分光光度計」公眾號

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